? ? ? ?當(dāng)樣品被引入填充有多孔顆粒的色譜柱時就開始液相色譜分離過程了。樣品被注入并通過流動的液相（流動相）輸送通過色譜柱。當(dāng)分析物遇到固定相時，它們會在不同程度上與其相互作用，并分離成可以分析或收集的純區(qū)域。對固定相具有強親和力的分析物將在色譜柱上停留更長時間。
? ? ? ?液相色譜柱的柱效是評價色譜性能的一項因素。樣品組分是否能在色譜柱中分離，同時取決于固定相的選擇、色譜操作條件和填料狀況。一般來說，塔盤數(shù)越多色譜柱的分離效率越好；或者說塔盤高度越小色譜柱的分離效率越好。今天，恒譜生將討論如何提高 HPLC的柱效。
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一、什么是柱效：
? ? ? ?效率是衡量某物效率的指標(biāo)，換句話說，它的工作可以做得有多好。對于色譜柱，效率是指分離的質(zhì)量。高分辨率導(dǎo)致窄峰占用更少的空間，這意味著可以分離更多的峰。這是高效色譜柱的基本定義，它是用平板計數(shù)理論表示的。
二、什么是塔板計數(shù)：
? ? ? 塔板計數(shù)是列由多個單獨的板組成的理論。在分析過程中樣品通過色譜柱從一塊板移動到另一塊板，在每一步都與固定相相互作用。
三、什么影響柱效：
? ? ? 塔板計數(shù)公式提供了一些明確的方法來增加理論塔板數(shù)從而提高效率。首先是增加保留時間，這是通過增加色譜柱長度來實現(xiàn)的，這樣流動相和分析物就需要更長的時間通過。接下來是底部的峰寬。這是色譜圖中峰開始和結(jié)束的點之間的距離。一般來說，這是由色譜分離度決定的。高分辨率會導(dǎo)致更小的峰寬，而低分辨率導(dǎo)致更寬的峰。影響分辨率的因素有很多，包括色譜柱柱管長度、粒徑、溫度和體積。然而，這可能只是因為色譜柱在持續(xù)使用后會失去其分離能力。
四、提高HPLC柱效可從以下幾個方面入手：
(1)降低流動相流速，但會增加分析時間。
(2)固定相用量減少，但色譜柱上樣量也減少。
(3)減小固定相的粒徑，但不能過多，過多后色譜柱的滲透性也會下降。
(4) 采用低粘度的流動相有利于快速傳質(zhì)，但不利于多組分分析。
(5)適當(dāng)提高柱溫可以降低流動相的黏度，但柱效和分離度也會降低。
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? ?今天恒譜生分享的知識先到這啦，希望對您的工作有所幫助！
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發(fā)布于: 2023-04-22