? ? ? ?每個實驗室的色譜分析工作者都很清楚，HPLC?分析使用液體作為載體，它將注入的樣品溶液輸送到色譜柱然后輸送到檢測器。這種載體可以是緩沖液與有機溶劑的水-有機混合物、有機-有機混合物。HPLC 系統(tǒng)的管道和閥門通道非常狹窄，使用未經(jīng)適當(dāng)過濾的溶液可能會導(dǎo)致堵塞。通過液相色譜儀運行清潔、無顆粒的 HPLC 級溶劑是一項基本維護方案。
一、對HPLC 系統(tǒng)的影響：
? ? ? ?使用過濾流動相以去除顆粒物質(zhì)能夠防止導(dǎo)致色譜柱堵塞，色譜柱不僅很昂貴而且被顆粒物堵塞會導(dǎo)致背壓增加或保留時間發(fā)生變化；還能最大限度地減少由于 LCMS、UPLC 和 HPLC 等靈敏度高的儀器設(shè)備中的精密閥門和管路堵塞而導(dǎo)致的系統(tǒng)停機時間。高級色譜溶劑/超純水通常通過 0.2 微米過濾器進行預(yù)過濾，以滿足其在色譜系統(tǒng)中使用的等級。但是，有時您也使用這些溶劑（含或不含化學(xué)試劑和添加劑）制備（混合）自己的流動相。當(dāng)您使用這些試劑級化學(xué)品或添加劑制備流動相時，還應(yīng)該在使用前通過 0.2 微米玻璃或鋼過濾器過濾最終混合物，這可以確保您的流動相儲液瓶在使用過程中是沒有污垢和灰塵等雜質(zhì)。
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二、溶劑過濾器的重要性：
? ? ? ?過濾和過濾器（又稱溶劑吸濾頭、流動相吸濾頭等）在 LC 系統(tǒng)中是非常重要的，因為流動相流路中如果存在微粒，LC 系統(tǒng)中的許多組件都容易過早失效。例如，從溶劑瓶中抽出的流動相中的灰塵或其他微粒會導(dǎo)致泵止回閥部分失效或完全失效（泵根本不產(chǎn)生流量）。所以在選擇流動相溶劑進行任何分析之前檢查流動相溶劑的完全混溶性很重要，同樣重要的是檢查它們在混合時不會相互反應(yīng)。否則懸浮顆粒物會導(dǎo)致柱內(nèi)積聚并產(chǎn)生背壓，從而影響流速和損壞泵的組件。最壞的情況還可以是接頭處可能會出現(xiàn)流動相泄漏并伴隨著分析運行停止的情況發(fā)生。還有最明顯的故障模式涉及進樣樣品或儀器組件中的微粒積聚在色譜柱入口處，從而導(dǎo)致色譜柱堵塞。
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三、選擇溶劑過濾器的選擇：
? ? ? ?選擇合適的過濾器需要了解過濾器/溶劑相容性以及過濾器的化學(xué)/物理特性。這些特性包括孔徑、孔分布、過濾器厚度、可提取物、疏水/親水特性、結(jié)合特性、熱原性、氣體和液體流速、爆破強度、高壓滅菌性、孔徑和標(biāo)稱顆粒保留。選擇不正確的過濾器可能會導(dǎo)致可提取材料危及分析結(jié)果。對于色譜分析，可萃取材料產(chǎn)生的情況包括樣品吸收、共流出和外來峰。在液相色譜的應(yīng)用中通常選擇孔徑為 0.45μm的在線過濾器，而對于細(xì)菌去除或超高液相色譜應(yīng)用中則適宜選擇 0.2μm 的在線過濾器。
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?? ? ? 今天恒譜生分享的知識先到這啦，希望對您的工作有所幫助！
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發(fā)布于: 2022-12-17