分離難題終結(jié)者:恒譜生 Hsol 氨基酸專用柱如何穩(wěn)定實(shí)現(xiàn) 17 種氨基酸同時(shí)分析?
?
?
對(duì)做過氨基酸檢測的實(shí)驗(yàn)室工程師來說,“能不能一次性把 17 種氨基酸分開”,從來不是一句簡單的問題。
在真實(shí)檢測場景中,這往往意味著:
● ?多個(gè)結(jié)構(gòu)高度相似的氨基酸要同時(shí)出峰
● ?同分異構(gòu)體必須基線或近基線分離
● ?衍生化產(chǎn)物之間不能互相干擾
● ?分析時(shí)間不能無限拉長,否則批量樣品根本跑不完
而這些要求,幾乎全部落在了色譜柱的選擇性與穩(wěn)定性上。
一、17 種氨基酸同時(shí)分析,真正“難”在哪里?
如果把氨基酸拆開來看,單個(gè)組分并不復(fù)雜;
真正的難點(diǎn)在于**“放在一起”**。
1?? 極性和結(jié)構(gòu)高度集中
大多數(shù)常見氨基酸同時(shí)具備:
● ?氨基(—NH?)
● ?羧基(—COOH)
● ?碳鏈長度差異不大
在反相體系下,如果固定相對(duì)極性基團(tuán)區(qū)分能力不足,就極易出現(xiàn):
● ?保留過近
● ?峰前沿或拖尾
● ?相鄰峰分離度不足
典型如:
Ile / Leu、Val / Thr、Gly / Ser 等組合。
2?? 衍生化后“差異被放大,也可能被掩蓋”
OPA、FMOC、PITC 等衍生化方法,確實(shí)提高了檢測靈敏度,但也帶來新問題:
● ?衍生效率微小差異 → 峰面積波動(dòng)
● ?衍生產(chǎn)物疏水性趨同 → 分離壓力反而加大
這時(shí),色譜柱如果“選擇性不足”,方法就會(huì)變得極其脆弱。
二、Hsol Amino 專用柱的分離設(shè)計(jì)邏輯
恒譜生在 Hsol 系列 Amino 氨基酸專用柱的設(shè)計(jì)上,并不是單純追求“更強(qiáng)保留”,而是圍繞 “差異化識(shí)別” 來構(gòu)建固定相行為。
1?? 針對(duì)氨基 / 羧基的定向相互作用
Hsol Amino 固定相對(duì)氨基酸分子中的極性基團(tuán)具有良好的識(shí)別能力,使不同側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的氨基酸在柱上表現(xiàn)出可控的保留差異。
這對(duì)分離同分異構(gòu)體尤為關(guān)鍵:
● ?亮氨酸 / 異亮氨酸
● ?纈氨酸 / 蘇氨酸
在實(shí)際測試中,這些組分均能獲得可用于定量的分離度。
2?? 粒徑與柱床均一性,保障分離“可復(fù)制”
采用 3 μm / 5 μm,120 ? 填料規(guī)格,并通過穩(wěn)定的柱床填充工藝,減少柱內(nèi)渦流和局部死體積。
這帶來的直接好處是:
● ?峰形更集中
● ?分離度在不同批次間更一致
● ?方法轉(zhuǎn)移時(shí)參數(shù)調(diào)整幅度小
對(duì)工程師來說,這意味著不是每換一根柱子就要重建方法。
三、從實(shí)測譜圖看 17 種氨基酸分離表現(xiàn)
在標(biāo)準(zhǔn)測試條件下,使用
Hsol Amino 5 μm,120 ?,4.6 mm × 250 mm 色譜柱,對(duì) 18 種氨基酸進(jìn)行分析:
● ?各峰保留時(shí)間分布均勻
● ?峰間分離度均符合分析要求
● ?無明顯峰重疊或異常拖尾
從數(shù)據(jù)來看:
● ?多數(shù)組分分離度 > 2
● ?關(guān)鍵相鄰峰(如 Ile / Leu)仍保持清晰區(qū)分
● ?高保留組分(Trp、Phe、Lys)峰形依然良好
這對(duì)于一次進(jìn)樣完成多組分定量,是非常關(guān)鍵的基礎(chǔ)條件。
四、為什么“同時(shí)分析”對(duì)實(shí)驗(yàn)室效率意義重大?
從工程師角度看,一次性分離 17 種氨基酸,帶來的并不僅是“好看”的譜圖。
1?? 減少方法拆分與多次進(jìn)樣
如果柱子分離能力不足,常見做法是:
● ?拆成兩套方法
● ?延長梯度時(shí)間
● ?多次進(jìn)樣拼數(shù)據(jù)
這直接增加了:
● ?人工成本
● ?儀器占用時(shí)間
● ?數(shù)據(jù)整合風(fēng)險(xiǎn)
穩(wěn)定的一次性分析方案,反而是最節(jié)省成本的方案。
2?? 對(duì)方法驗(yàn)證更友好
在方法學(xué)驗(yàn)證中,分離度不足往往是最容易“卡住”的指標(biāo)之一。
Hsol Amino 氨基酸專用柱在設(shè)計(jì)上保留了足夠的分離余量,使得:
● ?線性、精密度、重復(fù)性驗(yàn)證更順暢
● ?稍有基質(zhì)變化,仍不至于失效
五、適合哪些工程師選擇這根柱子?
如果你的工作涉及:
● ?食品 / 飼料中多種氨基酸同時(shí)定量
● ?藥典方法下的氨基酸測定
● ?衍生化氨基酸的批量檢測
● ?方法需要長期穩(wěn)定運(yùn)行
那么,與其不斷在方法上“補(bǔ)救”,不如從一根分離邏輯清晰、穩(wěn)定性可靠的氨基酸專用柱入手。
六、工程師真正需要的,是“可控的分離”
對(duì)實(shí)驗(yàn)室工程師而言,好的色譜柱并不是“參數(shù)最夸張的那一根”,而是:
條件可控
結(jié)果可復(fù)制
?問題可預(yù)期
恒譜生 Hsol 系列 Amino 氨基酸專用柱,正是圍繞這種實(shí)際需求設(shè)計(jì),幫助工程師把精力更多放在樣品與結(jié)果本身,而不是反復(fù)“救方法”。
發(fā)布于: 2025-12-23


