?如何選擇和使用保護(hù)柱？
選擇和使用保護(hù)柱需要綜合考慮多個(gè)因素，以下是一些關(guān)鍵要點(diǎn)：
保護(hù)柱的選擇
1、與色譜柱的匹配性
填料類型：保護(hù)柱的填料應(yīng)與所使用的色譜柱填料具有相似的化學(xué)性質(zhì)和分離機(jī)制。例如，反相色譜柱通常搭配反相保護(hù)柱，填料如 C18、C8 等;正相色譜柱則需選擇正相保護(hù)柱，如硅膠等填料。
柱尺寸：保護(hù)柱的內(nèi)徑和長(zhǎng)度應(yīng)與色譜柱相匹配。一般來說，保護(hù)柱的內(nèi)徑與色譜柱相同或略小，長(zhǎng)度通常在 20-50mm 之間，以確保在不增加過多柱壓的情況下提供有效的保護(hù)。
2、樣品特性
樣品的復(fù)雜性：對(duì)于復(fù)雜樣品，如生物樣品、環(huán)境樣品等，其中可能含有較多的雜質(zhì)、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等，應(yīng)選擇具有較強(qiáng)吸附能力和高分辨率的保護(hù)柱，以更好地去除雜質(zhì)，保護(hù)色譜柱。
樣品的酸堿度：如果樣品的酸堿度較強(qiáng)，需要選擇耐酸堿性好的保護(hù)柱，如采用特殊處理的不銹鋼柱體或耐酸堿的聚合物材料制成的保護(hù)柱，以防止柱體被腐蝕。
3、分析需求
分離要求：如果對(duì)分離度要求較高，需要選擇柱效高、填料粒徑小的保護(hù)柱，以確保在保護(hù)色譜柱的同時(shí)，不會(huì)對(duì)分離效果產(chǎn)生明顯影響。
通量要求：在高通量分析中，應(yīng)選擇柱壓較低、流通性好的保護(hù)柱，以減少系統(tǒng)壓力，提高分析速度。
保護(hù)柱的使用
1、安裝與連接
正確安裝：安裝保護(hù)柱時(shí)，應(yīng)確保其與色譜柱連接緊密，避免出現(xiàn)漏液現(xiàn)象。通常使用專用的連接接頭，并按照儀器說明書的要求進(jìn)行安裝，擰緊力度要適中，防止損壞柱體。
連接順序：保護(hù)柱應(yīng)安裝在進(jìn)樣閥與色譜柱之間，確保樣品在進(jìn)入色譜柱之前先經(jīng)過保護(hù)柱，起到過濾和吸附雜質(zhì)的作用。
2、使用條件
流動(dòng)相的選擇：保護(hù)柱使用的流動(dòng)相應(yīng)與色譜柱相同或相似，避免使用可能與保護(hù)柱填料發(fā)生相互作用的流動(dòng)相，以免影響保護(hù)效果或?qū)е轮陆怠?/span>
流速的控制：應(yīng)根據(jù)保護(hù)柱的規(guī)格和色譜柱的要求，合理控制流動(dòng)相的流速。流速過高可能會(huì)導(dǎo)致柱壓過高，影響保護(hù)柱和色譜柱的使用壽命;流速過低則會(huì)延長(zhǎng)分析時(shí)間。
3、維護(hù)與更換
定期清洗：在使用一段時(shí)間后，保護(hù)柱內(nèi)可能會(huì)積累一定的雜質(zhì)，需要定期進(jìn)行清洗。清洗方法通常是用適當(dāng)?shù)娜軇_洗保護(hù)柱，如甲醇、乙腈等有機(jī)溶劑或含有一定比例有機(jī)溶劑的水溶液，具體沖洗方法可參考保護(hù)柱的說明書。
及時(shí)更換：當(dāng)保護(hù)柱的柱效明顯下降或出現(xiàn)柱壓升高等異常情況時(shí)，應(yīng)及時(shí)更換保護(hù)柱，以免影響色譜柱的性能。
恒譜生根據(jù)色譜柱類型和分析要求，制作了不同類型的色譜保護(hù)柱:
1、直連型通過直接與分析柱相連，簡(jiǎn)化操作，減少泄露和死體積;
2、旋轉(zhuǎn)型設(shè)計(jì)便于安裝拆卸，避免管路打結(jié)，提高穩(wěn)定性;
3、PEEK型采用高性能PEEK材質(zhì)，具有優(yōu)異的化學(xué)和熱穩(wěn)定性，適用于金屬離子敏感分析。
發(fā)布于: 2024-12-26