C18固相萃取小柱是一種常用的樣品處理技術(shù)，主要用于分離和凈化生物樣品中的有機(jī)化合物。以下是C18固相萃取小柱的使用方法：
1. 準(zhǔn)備工作：
a. 確保實(shí)驗(yàn)室環(huán)境干凈整潔，通風(fēng)良好。
b. 準(zhǔn)備好所需的實(shí)驗(yàn)器材和試劑，如C18固相萃取小柱、離心機(jī)、渦旋振蕩器、天平、移液器等。
c. 根據(jù)待測(cè)樣品的量選擇合適的C18固相萃取小柱規(guī)格。
2. 樣品處理：
a. 首先將待測(cè)樣品溶于適當(dāng)?shù)娜軇┲校ǔＪ褂眉状蓟蛞译孀鳛槿軇?/span>
b. 在渦旋振蕩器上充分混勻樣品溶液，然后通過(guò)離心機(jī)去除殘留的氣泡。
c. 用移液器將適量的樣品溶液轉(zhuǎn)移到C18固相萃取小柱上，注意不要超過(guò)小柱的容量。
d. 將C18固相萃取小柱放入離心機(jī)中，以適當(dāng)?shù)乃俣入x心，使樣品溶液充分滲透到小柱中。
3. 洗滌步驟：
a. 用適量的新鮮溶劑(如水或甲醇)沖洗C18固相萃取小柱，以去除多余的樣品溶液。
b. 重復(fù)上述洗滌步驟，直到流出的溶劑無(wú)色清澈。
c. 將洗滌后的C18固相萃取小柱放在離心機(jī)中離心，以去除殘留的溶劑。
4. 收集目標(biāo)物質(zhì)：
a. 從C18固相萃取小柱上切下一段合適長(zhǎng)度的部分，將其插入濾紙或?yàn)V膜上。
b. 將濾紙或?yàn)V膜放入離心機(jī)中，加入適量的洗脫劑(如甲醇或乙腈)，離心后收集濾紙上的洗脫液。
c. 重復(fù)上述操作，直到濾紙上的洗脫液顏色變淺或不再有明顯的變化。
5. 分析目標(biāo)物質(zhì)：
a. 對(duì)收集到的洗脫液進(jìn)行光譜分析，如紫外-可見(jiàn)光譜、紅外光譜或質(zhì)譜分析等。
b. 根據(jù)分析結(jié)果，確定待測(cè)樣品中的有機(jī)化合物的種類和含量。
6. 廢棄物處理：
a. 對(duì)于一次性使用的C18固相萃取小柱，在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)按照當(dāng)?shù)丨h(huán)保法規(guī)妥善處理。
b. 對(duì)于可重復(fù)使用的C18固相萃取小柱，在清洗并晾干后可以再次使用。
7. 注意事項(xiàng)：
a. 在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要保持良好的實(shí)驗(yàn)室習(xí)慣，避免交叉污染。
b. 不同類型的C18固相萃取小柱可能需要不同的洗脫條件，因此在實(shí)際操作時(shí)需根據(jù)具體情況調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟。
發(fā)布于: 2023-09-12