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為什么選擇?恒譜生?色譜耗材

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一、色譜分析保護(hù)柱的常見(jiàn)問(wèn)題解答

 

 

1、保護(hù)柱是否會(huì)影響樣品分析?

 

安裝保護(hù)柱確實(shí)會(huì)對(duì)分離度和柱效產(chǎn)生一定影響，因?yàn)楸Ｗo(hù)柱中間存在死體積。但如果保護(hù)柱安裝得當(dāng)，并且經(jīng)常更換，這種影響通常不大。對(duì)于某些分析，如頭孢類(lèi)抗生素的原料藥，可以根據(jù)色譜柱的損耗選擇是否添加保護(hù)柱;而對(duì)于制劑，如果輔料干擾嚴(yán)重或流動(dòng)相鹽分較大，則建議使用保護(hù)柱。

 

 

2、保護(hù)柱的使用成本是否過(guò)高?

 

保護(hù)柱的成本通常約為色譜柱采購(gòu)價(jià)的10%-20%。雖然保護(hù)柱會(huì)增加一定的成本，但通過(guò)定期更換保護(hù)柱，可以有效延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命，從長(zhǎng)遠(yuǎn)來(lái)看，總體成本是合理的。

 

 

3、保護(hù)柱的再生方法是什么?

 

保護(hù)柱的再生通常采用反接沖洗的方式。例如，可以用10%甲醇水沖洗30分鐘，然后用純甲醇沖洗30分鐘。不過(guò)，再生后的保護(hù)柱性能可能會(huì)有所下降，因此建議定期更換保護(hù)柱以確保最佳效果。

 

 

4、保護(hù)柱和在線過(guò)濾器的區(qū)別是什么?

 

在線過(guò)濾器主要用于過(guò)濾大于篩板孔徑的雜質(zhì)，死體積較小，清洗方便。而保護(hù)柱不僅能過(guò)濾固體雜質(zhì)，還能吸附強(qiáng)極性、強(qiáng)酸性或強(qiáng)堿性物質(zhì)，對(duì)色譜柱進(jìn)行更全面的保護(hù)。不過(guò)，保護(hù)柱的死體積較大，可能會(huì)對(duì)分離效率產(chǎn)生一定影響。

 

 

二、色譜分析保護(hù)柱的應(yīng)用

 

 

1、藥物分析領(lǐng)域

 

在藥物研發(fā)和質(zhì)量控制中，色譜保護(hù)柱能夠有效去除藥物樣品中的雜質(zhì)，如合成殘留物、中間體、催化劑等，確保分析柱對(duì)藥物主成分及其雜質(zhì)的準(zhǔn)確分離和定量分析。例如，在抗生素藥物的分析中，保護(hù)柱可防止蛋白質(zhì)等大分子雜質(zhì)污染分析柱。

 

 

2、環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域

 

對(duì)于環(huán)境水樣、土壤提取物等復(fù)雜樣品的分析，保護(hù)柱可以過(guò)濾掉樣品中的泥沙、膠體等雜質(zhì)，避免這些雜質(zhì)對(duì)分析柱的污染，從而提高分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

 

 

3、食品安全檢測(cè)領(lǐng)域

 

在食品樣品的分析中，保護(hù)柱能夠去除樣品中的顆粒物和強(qiáng)保留物質(zhì)，防止分析柱堵塞和污染，確保色譜柱的分離性能和使用壽命。

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三、色譜分析保護(hù)柱的技術(shù)原理

 

 

1、雜質(zhì)吸附與截留

 

保護(hù)柱中的填充材料能夠?qū)悠分械碾s質(zhì)進(jìn)行吸附和截留，防止這些雜質(zhì)進(jìn)入分析柱，從而避免分析柱被污染和損壞。

 

 

2、防止固定相污染

 

保護(hù)柱可以截留與固定相發(fā)生不可逆反應(yīng)的化合物，避免這些化合物污染分析柱中的固定相，從而維持色譜柱的分離性能。

 

 

3、維持系統(tǒng)穩(wěn)定性

 

保護(hù)柱通過(guò)去除樣品中的雜質(zhì)，有助于維持系統(tǒng)的壓力穩(wěn)定，保證流動(dòng)相的流速均勻性，減少因雜質(zhì)積累而導(dǎo)致的基線噪聲和漂移現(xiàn)象。

 

 

如何選擇色譜保護(hù)柱的規(guī)格型號(hào)

 

 

選擇色譜保護(hù)柱的規(guī)格型號(hào)需綜合考慮分析柱參數(shù)、樣品特性、儀器兼容性及實(shí)驗(yàn)需求，以下是具體維度和選型建議：

 

一、固定相匹配：確保分離行為一致

 

保護(hù)柱的固定相需與分析柱完全一致，包括填料類(lèi)型、鍵合相、孔徑和碳載量等，否則可能導(dǎo)致保留時(shí)間偏移或分離度下降。

 

 

二、尺寸參數(shù)匹配：減少死體積影響

 

保護(hù)柱的內(nèi)徑、長(zhǎng)度和填料粒徑需與分析柱嚴(yán)格匹配，避免柱效損失或峰展寬。

 

1.?內(nèi)徑（ID）

 

必須與分析柱完全一致，常見(jiàn)規(guī)格：

 

常規(guī) HPLC：4.6 mm(搭配 4.6 mm 分析柱)

 

UHPLC：2.1 mm(搭配 2.1 mm 分析柱)

 

微徑柱：1.0 mm(搭配 1.0 mm 分析柱)

 

2.?長(zhǎng)度

 

常規(guī)長(zhǎng)度：5–20 mm(過(guò)長(zhǎng)可能增加死體積)

 

簡(jiǎn)單樣品：可選 5–10 mm 短柱(如食品中農(nóng)藥殘留分析)

 

復(fù)雜樣品：建議 10–20 mm 長(zhǎng)柱(如生物樣品中的雜質(zhì)攔截)

 

3.?填料粒徑

 

需與分析柱相同，例如：

 

分析柱為 5 μm 填料 → 保護(hù)柱選 5 μm

 

UHPLC 分析柱為 1.7 μm 填料 → 保護(hù)柱選 1.7 μm

 

 

三、化學(xué)兼容性：適應(yīng)流動(dòng)相條件

 

1.?pH 耐受范圍

 

根據(jù)流動(dòng)相 pH 選擇保護(hù)柱基質(zhì)：

 

硅膠基質(zhì)：適用于 pH 2–8(如常規(guī)反相 / 正相分析)

 

聚合物基質(zhì)：適用于 pH 1–14(如極端酸堿條件下的肽類(lèi)分析)

 

2.?耐溶劑性

 

確保保護(hù)柱填料與流動(dòng)相有機(jī)溶劑兼容：

 

避免正相保護(hù)柱接觸含水性流動(dòng)相(如硅膠柱遇水可能坍塌)

 

反相保護(hù)柱需耐受高比例有機(jī)相(如乙腈、甲醇)

 

 

四、樣品特性：針對(duì)性攔截雜質(zhì)

 

1.?雜質(zhì)類(lèi)型

 

顆粒雜質(zhì)：優(yōu)先選篩板孔徑小的保護(hù)柱(如 2 μm 篩板攔截細(xì)微顆粒)

 

強(qiáng)保留物質(zhì)：

 

蛋白質(zhì) → 選蛋白質(zhì)兼容型保護(hù)柱

 

金屬離子 → 選螯合型保護(hù)柱

 

極性 / 非極性雜質(zhì)：根據(jù)樣品極性選擇對(duì)應(yīng)固定相(如極性樣品用極性保護(hù)柱預(yù)吸附)

 

2.?樣品復(fù)雜度

 

簡(jiǎn)單樣品(如純品溶液)：可選通用型保護(hù)柱(如 C18)

 

復(fù)雜樣品(如血清、土壤提取物)：

 

選專(zhuān)用保護(hù)柱

 

 

五、儀器兼容性：適配系統(tǒng)壓力與流速

 

1.?耐壓能力

 

HPLC 系統(tǒng)：保護(hù)柱耐壓需≥400 bar(常規(guī) HPLC 壓力)

 

UHPLC 系統(tǒng)：需選耐壓≥1200 bar 的保護(hù)柱

 

2.?連接方式

 

確保接口與儀器匹配：

 

常規(guī)螺紋接口(如 1/16 英寸)

 

UHPLC 專(zhuān)用接口(如 Eka-Chem 或 Peek 材質(zhì)，減少死體積)

 

 

六、品牌與型號(hào)適配：優(yōu)先原廠或兼容替代

 

1.?原廠保護(hù)柱

 

優(yōu)勢(shì)：與分析柱參數(shù)完全匹配，性能穩(wěn)定

 

2.?第三方兼容保護(hù)柱

 

需驗(yàn)證兼容性：

 

檢查固定相參數(shù)(如碳載量、孔徑)

 

測(cè)試保留時(shí)間重復(fù)性(偏差應(yīng)<5%)

 

 

七、選型流程示例

 

場(chǎng)景：使用恒譜生C18(4.6 mm×150 mm，5 μm，pH 2–8)分析血漿中的藥物殘留。

 

選型步驟：

 

固定相：選 C18 保護(hù)柱(如 恒譜生C18色譜柱)。

 

尺寸：內(nèi)徑 4.6 mm，長(zhǎng)度 10 mm，填料 5 μm。

 

化學(xué)兼容性：流動(dòng)相 pH 3–7.選硅膠基質(zhì)(耐 pH 范圍匹配)。

 

雜質(zhì)類(lèi)型：血漿含蛋白質(zhì)，選帶蛋白質(zhì)攔截功能的保護(hù)柱(如內(nèi)置蛋白捕集層)。

 

儀器：常規(guī) HPLC，耐壓≥400 bar 即可。

 

 

注意事項(xiàng)

 

避免過(guò)度依賴(lài)再生：保護(hù)柱再生僅限輕度污染，強(qiáng)保留雜質(zhì)需及時(shí)更換。

 

預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證：新保護(hù)柱使用前，進(jìn)空白樣品確認(rèn)無(wú)鬼峰或基線干擾。

 

記錄維護(hù)日志：追蹤保護(hù)柱使用次數(shù)、柱壓變化，優(yōu)化更換周期。

 

通過(guò)以上維度綜合考量，可精準(zhǔn)選擇適配的色譜保護(hù)柱，最大化提升分析柱壽命與數(shù)據(jù)可靠性。如需特定品牌或應(yīng)用場(chǎng)景的選型建議，可進(jìn)一步提供細(xì)節(jié)!